Необходимо решить задачу:
Ниже приведены последовательности двух фрагментов ДНК, выделенных из организмов разных видов.
5`-АААГЦТТЦТГААТЦЦГАТЦГ-3`
3`-ТТТЦГААГАЦТТАГГЦТАГЦ-5`
5`-ГТАЦТЦАГАТЦЦТАГГАТААГЦТТА-3`
3`-ЦАТГАГТЦТАГГАТЦЦТАТТЦГААТ-5`
С помощью каких ферментов можно получить гибридную молекулу ДНК из этих фрагментов? Опишите последовательные этапы получения гибридной молекулы.
ПРИМЕР РЕШЕНИЯ
Задача №4. Ниже приведены последовательности двух фрагментов ДНК, выделенных из организмов разных видов.
1) 5`-АГЦАТАЦТГТГААТТЦАЦА-3`
3`-ТЦГТАТГАЦАЦТТААГТГТ-5`
2) 5`-АТГААТТЦТТАГЦАТАЦ-3`
3`-ТАЦТТААГААТЦГТАТГ-5`
С помощью каких ферментов можно получить гибридную молекулу ДНК из этих фрагментов? Опишите последовательные этапы получения гибридной молекулы.
Решение:
На первом этапе необходимо разрезать представленные фрагменты ДНК разных видов с помощью подходящих рестрикционных ферментов. В данном случае можно использовать рестриктазу EcoRI, которая расщепит ДНК двух видов на четыре новых фрагмента 1а, 1б и 2а, 2б с липкими концами ААТТ и ТТАА:
1а) 5`-АГЦАТАЦТГТГ 1б) ААТТЦАЦА-3`
3`-ТЦГТАТГАЦАЦТТАА ГТГТ-5`
2а) 5`-АТГ 2б) ААТТЦТТАГЦАТАЦ-3`
3`-ТАЦТТАА ГААТЦГТАТГ-5`
В ходе второго этапа необходимо смешать нужные нам фрагменты 1а и 2б. В результате выступающие липкие концы скрепятся между собой, как им и положено, водородными связями в силу комплементарности.
5`-АГЦАТАЦТГТГ А-А-Т-Т-ЦТТАГЦАТАЦ-3`
3`-ТЦГТАТГАЦАЦ-Т-Т-А-А ГААТЦГТАТГ-5`
Окончательное скрепление фрагментов 1а и 2б двух молекул ДНК производит специализированный фермент ДНК-лигаза, которая «сшивает» между собой сахарофосфатные остовы обоих фрагментов с образованием полной структуры двойной спирали ДНК.
Во вложении таблица с ферментами для первого этапа задачи.
Роман
Ранхигс
Задачи решила очень быстро и достаточно подробно описала каждый ответ. Спасибо!
Камилла федорова
Плехановский
Невероятно быстро и точно по заданию, спасибо вам, буду рада если возьметесь за остальные ...
Олег
УГЛТУ
Благодарю данного автора за помощь в выполнении заданий (экз.тест) по дисциплине "Основы п...
Галина
КубГАУ
Спасибо большое за помощь! Отличный исполнитель и отзывчивый. Всем рекомендую.